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PBMC細(xì)胞凍存液使用方法及注意事項(xiàng)

更新時(shí)間:2022-08-22      點(diǎn)擊次數(shù):4805

細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。目前,細(xì)胞凍存的技術(shù)是液氮冷凍保存法,利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細(xì)胞暫時(shí)脫離生長(zhǎng)狀態(tài),并保持細(xì)胞特性。通過冷凍方式保存細(xì)胞,可以在需要時(shí)進(jìn)行復(fù)蘇及繼續(xù)培養(yǎng)。


最佳的冷凍條件是盡可能地降低細(xì)胞內(nèi)的晶體形成,減少細(xì)胞內(nèi)水凝固所形成的高濃度溶質(zhì)對(duì)細(xì)胞造成的低溫?fù)p傷。除了我們知道的 緩慢冷凍,液氮低溫保存,快速?gòu)?fù)蘇外,凍存液的選擇也非常重要。


1    產(chǎn)品簡(jiǎn)介


匯智和源無(wú)血清細(xì)胞凍存液,優(yōu)化了其配方組分,能夠更大程度的減少細(xì)胞在凍存、復(fù)蘇時(shí)的損傷。


本品不含血清,降低了DMSO的含量,屬于即用型細(xì)胞凍存液,無(wú)需配制,直接在細(xì)胞中加入適量的凍存液即可。對(duì)于PBMC細(xì)胞、干細(xì)胞或T淋巴細(xì)胞等細(xì)胞具有較好的保護(hù)能力,讓你輕松擁有高活率的細(xì)胞。


2    產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)


成分:不含血清,降低了DMSO含量


高效:長(zhǎng)期凍存后復(fù)蘇的細(xì)胞,仍然可以達(dá)到滿意的復(fù)蘇率


方便:即用型,無(wú)需額外配制


安全:無(wú)微生物污染風(fēng)險(xiǎn),批次穩(wěn)定


3    凍存流程


1、凍存管、梯度凍存盒放進(jìn)4℃冰箱提前預(yù)冷;


2、將要進(jìn)行凍存的PBMC細(xì)胞、干細(xì)胞或T淋巴細(xì)胞等細(xì)胞, 350g 離心 7 分鐘,棄去上清并收集細(xì)胞。


3、加入?yún)R智和源無(wú)血清細(xì)胞凍存液,吸管輕輕吹打,重懸細(xì)胞。計(jì)數(shù)并調(diào)整細(xì)胞濃度;


4、將細(xì)胞懸液分裝于無(wú)菌凍存管中,每管加1mL細(xì)胞懸液,旋好凍存管并仔細(xì)檢查,一定要蓋緊,做好標(biāo)記;


5、凍存:細(xì)胞放入梯度凍存盒,先在-20℃放1-2個(gè)小時(shí),再放入 -80℃冰箱過夜,再轉(zhuǎn)入液氮罐。

4    細(xì)胞凍存的注意事項(xiàng)


1、緩慢冷凍,細(xì)胞逐步脫水,不會(huì)因產(chǎn)生大的冰晶而受到損害


2、細(xì)胞在-20C冰箱內(nèi)放置時(shí)間不可超過1小時(shí),以防止冰晶過大而破壞細(xì)胞。


3、保存在-80°C冰箱中的時(shí)間不要超過24h,放入液氮中保存;


4、凍存管的蓋子一定要擰緊,否則復(fù)蘇水浴時(shí)會(huì)滲水,造成支原體污染;


5、定期檢查液氮儲(chǔ)備,保證細(xì)胞全部浸在液面下。


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